摘要: 【目的】探讨穴位埋线法对实验性癫痫大鼠脑电图的影响。【方法】将50只大鼠随机分为空白组、模型组、埋线组、西药组（剂量为15mg/kg丙戊酸钠）、针刺组，分组进行预处理后，以腹腔注射青霉素钠（570万U/kg）复制大鼠癫痫模型，观察各组造模后70～85min内脑中线Fz区与Pz区脑电图电压、频率的变化。【结果】模型组Fz区与Pz区的电压高于空白组（P<0.01），而埋线组、西药组、针刺组的电压均低于模型组（P<0.05或P<0.01）;模型组造模后脑电频率A变慢，而埋线组、西药组、针刺组的频率A均比模型组增快，其中埋线组最快，对频率A的影响以Pz区明显（P<0.05或P<0.01）;模型组造模后Fz区与Pz区脑电频率B也变慢，埋线组和针刺组频率B均增快（P<0.05或P<0.01），西药组频率B增快不明显（P>0.05）。【结论】穴位埋线、针刺和西药丙戊酸钠均可降低癫痫大鼠痫性放电电压、增快脑电频率，具有抗痫作用。但与单纯针刺相比，穴位埋线可延长穴位刺激效应时间，减少治疗频率，而与西药治疗相比则可避免西药的毒副作用。
关键词: 癫痫/穴位疗法; 穴位埋线结扎; 脑电描记术; 疾病模型，动物; 大鼠
癫痫（epilepsy）是因大脑神经细胞过量放电所引起的大脑功能失调，以反复癫痫发作为特征的慢性临床综合征。虽然癫痫的种类繁多，病因多样，发病机理也不相同，但大量神经元反复发作的异常同步放电却是其细胞水平的基本特点之一 ［1］ 。癫痫的发作期存在脑电图的改变，一般可描记到痫性放电。脑电图对癫痫的诊断、指导用药和预后评价都有重要作用。目前，癫痫的抗痫治疗效果还不令人满意，我们的临床研究提示穴位埋线治疗癫痫有较好的疗效 ［2-3］ ，但从动物实验来探讨穴位埋线对痫性放电的抑制作用还少见。我们采用SD大鼠穴位埋线预处理后，再给予青霉素钠腹腔注射致痫，观察穴位埋线对癫痫模型大鼠脑电图的影响。
1 材料与方法
1.1 动物 健康SD大鼠50只（河南医科大学实验动物中心提供），雄性，体质量170～200g。随机分为空白组、模型组、埋线组、针刺组、西药组5组，每组10只。
1.2 药物与试剂 丙戊酸钠（湖南省湘中制药有限公司，0.2g/片，批号为040309）;注射用青霉素钠（哈药集团制药总厂，160万U/支，批号:
B04022914）;灭菌注射用水（天津药业焦作有限公司，2mL/支，批号为031001-1）。取0.2g丙戊酸钠研细末，加蒸馏水至10mL，混匀，配成20g/L的丙戊酸钠溶液灌胃。
1.3 仪器 日本光电公司ME-175E-W脑电图机;北京新拓仪器研究所NT9216型脑电分析系统。
1.4 癫痫大鼠模型的造模方法 取青霉素钠160万U，加灭菌注射用水2mL配成57万U/mL的青霉素钠溶液。经过预实验和参考文献［1］介绍的方法，按570万U/kg的剂量腹腔注射青霉素钠复制癫痫大鼠模型。
1.5 治疗方法 西药组将丙戊酸钠以成人每天15mg/kg按体表面积换算成大鼠的剂量，分上、下午各灌胃1次，每次剂量均为全天剂量的一半，其他4组给予等容积的蒸馏水灌胃，方法同西药组。各组连续灌胃3d，最后1次灌胃完毕时，模型组、埋线组、针刺组、西药组均腹腔注射青霉素钠溶液造模，而空白组腹腔注射等容积的灭菌注射用水。其中，埋线组首次蒸馏水灌胃后即埋线1次，取大鼠“大椎”、“肝俞”透“胆俞”（双侧）、“丰隆”（双侧），穴位定位方法依照《实验针灸学》 ［4］ ，将2/0号的医用羊肠线（北京第三皮件厂生产，批号为933）剪成0.3～0.5cm长，络合碘消毒穴位，采用注射针头埋线法，迅速埋线;针刺组取穴同埋线组，首次蒸馏水灌胃后，络合碘消毒穴位，用28号1寸的毫针针刺，平补平泻，每次留针30min，每隔10min行针1次，每天上午针1次。
1.6 脑电图描记方法 采用ME-175E-W脑电图机与NT9216型脑电分析系统，在空白组腹腔注射灭菌注射用水、其他组腹腔注射青霉素钠溶液造模70min后开始描记大鼠清醒状态下的脑电图10min。大鼠固定在自制的大鼠固定器中 ［5］ ，采用单极导联法，在大鼠脑中线区的两目之间上0.5cm处（额中线区，又称Fz区）和两耳之间（顶中线区，又称Pz区）的皮层下分别插入一根针式电极，再依次与FP 1 和F 3 导联的电极线相连，左耳电极夹在左耳上，大鼠尾部以针式电极接地。为排除干扰，其他脑电图机上的电极均接在一只长镊子上，达到等电位后脑电图显示均为平线。定标:10μV/mm，走纸速度:30mm/s，时间常数:0.3s，滤波:30Hz，增益:×1.0。每次记录前先在显示器上观察信号，待信号基线平稳后，走纸描记，同时将信号保存于计算机硬盘上。脑电图的频率分析用NT9216型脑电分析系统的平均参数功能，用电压反映波幅，δ、θ、α波用频率A分析，β波用频率B分析。
1.7 统计学处理 数据采用统计分析软件SPSS11.5for Windows进行统计处理，多组均数比较用方差分析法。满足正态性和方差齐性时，两两比较用LSD法;方差不齐时，选用Dunnett's T3法。
2 结果
2.1 青霉素致痫大鼠脑电图特征 空白组大鼠中线区的脑电图主要由10～13Hz、20～30μV的α波、15～21Hz、10～15μV的β波和5～7Hz、15～30μV的θ波组成，未见δ波;α波较少、α节律少见，β波较多、散发，低幅θ波也较多、杂乱出现。模型组大鼠脑波频率变慢，慢波增多，均出现典型的癫痫波，表现为高幅θ、δ增多或呈短—长程阵发，棘波、尖波爆发，或棘—慢综合波、尖—慢综合波阵发。埋线组、针刺组、西药组大鼠脑波频率快于模型组;与模型组比较，3个治疗组的癫痫波数量减少，波幅降低，持续时间缩短，并且Fz区和Pz区的脑电波波形相似，但Fz区的波幅一般高于Pz区。各组大鼠的脑电图比较见图1。
2.2 穴位埋线对致痫大鼠脑电图电压的影响 结 果见表1。从表1可知，模型组Fz区与Pz区的电压高于空白组（P<0.01），表明造模后大鼠脑电电压增高，出现高幅痫性放电。埋线组、西药组、针刺组的电压均低于模型组（P<0.05或P<0.01），提示3组均能降低癫痫大鼠脑电电压，降低痫性放电幅度，但3组之间差异均无显著性意义（P>0.05）。埋线组Fz区、Pz区的电压均降至接近空白组（P>0.05）。
2.3 穴位埋线对致痫大鼠脑电频率的影响 结果见表2。表1 各组大鼠脑电图电压的比较表2 各组大鼠脑电频率的比较从表2可知，模型组造模后Fz区与Pz区脑电频率A变慢，而埋线组、西药组、针刺组频率A均比模型组增快，以埋线组最快，但3组之间差异均无显著性意义（P>0.05），对频率A的影响以Pz区表现明显。模型组造模后Fz区与Pz区脑电频率B也变慢，埋线和针刺都可使频率B加快（P<0.05或P<0.01），西药对频率B无显著性影响。
3 讨论
癫痫（epilepsy）是一种慢性临床综合征，以大脑神经元反复、突发异常放电导致的脑功能障碍为特征。脑电图（EEG）为检查脑功能状态的电生理技术，是癫痫诊断治疗必不可少的检查方法。由于抗癫痫西药的毒副作用及对行为、认知功能的负性影响，中医药治疗癫痫倍受关注。近10年来，我们采用穴位埋线为主治疗癫痫取得了较满意的效果 ［2-3］ ，本实验是进一步证实穴位埋线法对癫痫脑电图的影响。
青霉素是经典的致痫剂，所复制的急性癫痫模型已获公认。青霉素大鼠癫痫模型是一种极为有效、操作简便的实验动物癫痫模型，所致癫痫放电持久稳定，可以用作抗癫痫药物疗效及癫痫发病机制的研究 ［6］ 。青霉素能抑制γ-氨基丁酸（GABA）能神经元，使内源性抑制性突触活动减弱，同时谷氨酸或乙酰胆碱介导的神经细胞兴奋性增强，导致癫痫发作性放电的产生和维持 ［7］ 。本文以570万U/kg的剂量腹腔注射青霉素钠复制实验性癫痫大鼠模型，模型组10只大鼠均有癫痫样发作的行为表现，有9只为Ⅲ～Ⅴ级的发作，主要表现为肢体抽动或强直，甚至是全身强直—阵挛发作，经检查造模后70～85min内的脑电图，10只大鼠均有癫痫波出现，表明本实验造模是成功的。
癫痫发作时存在痫性放电，脑电图上则出现癫痫波。癫痫发作的程度与癫痫波波幅（电压）相 关，癫痫放电电压越高，癫痫发作越严重。本文结果显示:穴位埋线可降低青霉素致急性癫痫大鼠脑电电压，提示穴位埋线可降低痫性放电的波幅，具有抑制痫性发作的作用。癫痫发作时脑电频率A变慢，减慢近2～3Hz，提示慢波增多，穴位埋线可抑制脑电频率A变慢，减少慢波的出现;癫痫发作时脑电频率B也变慢，也就是β波的频率也变慢，减慢近3Hz，穴位埋线能抑制频率B的减慢，维持脑电正常频率。本实验的结果与周龙友 ［8］ 、吴定宗 ［9］ 、昂文平 ［10］ 等人的针刺对癫痫模型脑电图的影响相一致，与李希希 ［11］ 的结果部分相符。本实验结果显示，埋线与针刺对青霉素致痫大鼠脑电图电压、频率的影响基本相同，从数值上看有优于西药的趋势，从脑电图角度证实了穴位埋线具有抗痫作用。
虽然埋线组与针刺组对癫痫大鼠脑电图的影响基本相同，但针刺需要每天或隔天针1次，而穴位埋线一般20～30d进行1次，具有省时省力、经济实用的特点。穴位埋线以羊肠线作为刺激物，羊肠线为异性蛋白，埋植于穴位后，在体内逐渐液化后吸收，对腧穴产生一种持久的非特异性刺激冲动，经脊髓后角上传丘脑及大脑皮层，在大脑皮层形成一个新的优势兴奋灶，对病灶产生良性诱导，使相应神经元的放电被削减乃至解除，从而有效控制痫性发作。
癫痫属于中医学的“痫病”范畴，其形成与多种因素有关，多由遗传或妊娠失调、胎儿禀赋不足等先天因素，或六淫邪毒、情志因素、饮食失调、脑部外伤、脑内虫证等后天因素，也有患中风等脑疾后诱发而致者，造成脏腑失调、痰浊阻滞、气机逆乱、风阳内动所致，治宜豁痰、熄风、定痫。督脉入脑，脑为元神之府，大椎归属督脉，为手足三阳经与督脉的交会穴，有清热熄风、宁神止痫之功;肝俞、胆俞为膀胱经上肝胆之背俞穴，有疏泄肝胆、熄风止痉之效;脾胃为后天之本，脾为生痰之源，丰隆为胃经络穴，一络通二经，乃健脾豁痰之要穴。三穴合用，共奏豁痰、熄风、定痫之功，标本同治，故可降低实验性癫痫大鼠脑电图痫性放电电压、调整脑电频率，具有显著的抗痫作用。此三穴，是我们在临床实践中优选出来的基本配穴处方，疗效肯定。在后续研究中将设立非经非穴和其他穴位的埋线对照组，进一步探讨该配穴处方的优越性。
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（1.广州中医药大学第二附属医院老年脑病研究所，广州510120;2.湖南中医学院针灸推拿系，湖南长沙410007）
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